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增强型蛋白印迹膜再生液图片
产品货号:
ZN1922
中文名称:
增强型蛋白印迹膜再生液
英文名称:
产品规格:
100ml
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
产品保存:4℃保存,一年有效
产品说明:增强型蛋白印迹膜再生液能够安全高效地从硝酸纤维素膜和 PVDF 膜上去除一抗和二抗,且不会破坏抗原,从而再次检测化学发光的免疫印迹。与重新跑一个SDS-PAGE 胶比较,不仅省时省力,而且可以消除重新上样而带来的误差,使可比性更强。
产品特点:
1.不需重新制胶电泳
2.节省珍贵样品,在同一张膜上使用相同的样品重新检测
3.高效,去除效果远优于自制缓冲液
4.温和配方,在抗体剥离及重新检测时不会对靶蛋白造成伤害
5.不含硫醇,无刺鼻气味
产品应用:
1.可重复使用硝酸纤维素膜或PVDF 膜,通过不同的一抗检测不同的标靶
2.可重新检测印迹,改正或优化初次实验中无效的抗体浓度
注意事项:
1.刚从冷冻保存中拿出来会出现 SDS的沉淀,建议温水溶解再使用。
2.建议先检测表达量较低的目的蛋白,用再生液处理后检测表达量高的蛋白。
3.本品适用于 NC 膜和 PVDF 膜,推荐使用 PVDF 膜,效果更佳。
4.本产品适用于 HRP 标记的二抗,且用化学发光法检测的印迹膜。
需要材料:
1.化学发光底物
2.用含 0.05%Tween-20的TBS或PBS
3.用于第一次和第二次蛋白质印迹实验的一抗和二抗
4.胶片,化学发光成像仪
使用方法:
注:膜可以 4℃保存在 PBS或TBS 中,直到可以进行剥离程序。
1.将再生液用温水溶解或室温平衡至溶解。
2.用 TBS-T或PBS-T 将膜洗10分钟×3次。
3.将印迹膜放入再生液中,室温孵育20-30分钟。使用足够的体积以确保印迹膜完全润湿(对于8×10cm 印迹需要约 20mL)。
注意:优化孵化时间和温度对于获得最佳结果是必不可少的。对于一些抗体,室温孵育就足够了。
然而,高亲和力抗体可能需要再温育5至10分钟。
4.用 TBS-T或PBS-T将膜洗10分钟×3次。
5.按如下方法检测:
A.完整去除二抗的测试:将膜进行发光检测,如果 5分钟内未检测到信号,则二抗已经成功地从抗原或一抗中去除。
B.完整去除一抗的测试:用 HRP 标记的二抗孵育膜,然后用洗涤缓冲液洗涤。孵育新的一抗和二抗,进行发光检测,如果 5分钟内没有检测到信号,则已经成功地将一抗从抗原中除去。
6.如果在步骤 5 中检测到信号,则返回步骤 2,再剥离 5-15分钟。一些抗原/抗体系统需要更高的温度或更长的孵育时间来完全去除它们。优化剥离时间和温度以确保完全去除抗体,同时防止对抗原的损伤。
7.确定膜被适当剥离后,可以进行第二次免疫印迹实验。
注意:1.印迹可以剥离和重复检测多次,但可能需要更长的曝光时间或更灵敏的化学发光底物。
如果抗原在再生液中变得不稳定,随后的反应可能导致信号降低。
2.剥离后建议重新封闭印记膜。
相关搜索:增强型蛋白印迹膜再生液
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